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Cassification
技術(shù)文章/ Technical Articles
在進(jìn)行低氧或高氧培養時(shí),確保細胞的存活率和生長(cháng)效率需要考慮以下幾個(gè)關(guān)鍵因素:
1. 精確控制氣體濃度:使用三氣培養箱可以精確控制氧氣和二氧化碳的濃度。例如,Thermo Scientific 的 HERAcell 三氣培養箱能夠提供接近機體內環(huán)境的培養條件,專(zhuān)為優(yōu)化哺乳動(dòng)物細胞生長(cháng)設計,能夠提供完善的低氧環(huán)境,以實(shí)現細胞更快、更健康地生長(cháng) 。
2. 細胞類(lèi)型和培養階段:不同的細胞類(lèi)型對氧氣和二氧化碳的濃度有不同的需求。例如,某些細胞在低氧條件下(如1%-5% O2)可能表現出更好的生長(cháng)和分化,而其他細胞可能需要更高的氧氣濃度。在培養的不同階段,細胞對氣體的需求也可能發(fā)生變化。
3. 溫度和pH值:維持適宜的溫度和pH值對細胞存活和生長(cháng)至關(guān)重要。大多數細胞培養需要在36°C至37°C的溫度下進(jìn)行,且pH值通常維持在7.4左右。使用基于CO2-碳酸氫鹽的緩沖液緩沖的培養基時(shí),需要使用外源性CO2來(lái)維持pH值 。
4. 避免污染:細胞培養過(guò)程中要嚴格無(wú)菌操作,避免細菌、真菌或支原體的污染,這些都會(huì )對細胞的存活率和生長(cháng)效率產(chǎn)生負面影響。
5. 營(yíng)養物質(zhì)和血清:培養基中的營(yíng)養物質(zhì)和血清對細胞的生長(cháng)和存活至關(guān)重要。需要確保培養基中的成分新鮮且未被破壞,且血清的質(zhì)量良好。
6. 細胞密度和傳代:細胞接種的密度和傳代的頻率也會(huì )影響細胞的生長(cháng)。過(guò)高的細胞密度或過(guò)于頻繁的傳代可能導致細胞應激和生長(cháng)減緩。
7. 監測和調整:定期監測細胞的生長(cháng)狀態(tài)和培養條件,及時(shí)調整氣體濃度、更換培養基和進(jìn)行必要的操作,以確保細胞的最佳生長(cháng)環(huán)境。
通過(guò)上述措施,可以在低氧或高氧培養條件下優(yōu)化細胞的存活率和生長(cháng)效率。
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