1. 關(guān)緊取樣室內外門(mén)，并抽真空校驗;

2. 接上氣路并檢查氣路，為防止漏氣，必要時(shí)可在各接管處用密封膠粘合; 使用 (一)操作室厭氧環(huán)境形成：按使用要求放置好必要的附件和器具，并向操作室內放入二個(gè)無(wú)毒塑料袋; 通電源開(kāi)照明燈，開(kāi)溫控儀，調節所需溫度及安全溫度;

3. 開(kāi)紫外線(xiàn)滅菌燈，室內進(jìn)行滅菌處理，滅菌時(shí)間按具體實(shí)驗.

4. 厭氧培養箱應安放在溫差較小、操作方便的位置，應避免陽(yáng)光直曬和遠離采暖設備，放置平穩; 2. 將混合氣瓶、氮氣瓶安放平穩，并分別裝好減壓閥(含壓力表)，安置在適當位置;

5. 操作室內第一次置換(氮氣置換)： A. 先用橡皮管插入操作室內進(jìn)氣口，另一頭插入塑料袋; B. 接通氮氣進(jìn)氣路，打開(kāi)氮氣控制閥，使二只塑料袋充足氮氣，關(guān)閉閥門(mén) 1，然后扎緊袋口; C. 把乳膠手套套在觀(guān)察板法蘭圈上并扎緊; D. 把塑料袋內氮氣漸漸放于操作室內，至全部放出。

6. 操作室內打開(kāi)粑粒除氧劑，接通除氧催化器電源進(jìn)行催化除氧，一小時(shí)后開(kāi)美蘭指示劑,觀(guān)察其變色情況，不變色為操作室內達到厭氧環(huán)境;

7. 操作室第三次置換(混合氣體置換)： A.調換氣路打開(kāi)混合氣閥進(jìn)氣，充氣時(shí)取樣室先抽真空，并隨時(shí)用腳踏開(kāi)關(guān)開(kāi)閉排氣; B.混合氣充滿(mǎn)塑料袋后，關(guān)掉混合氣閥，并打開(kāi)閥，使混合氣經(jīng)過(guò)流量計，調整流量計，流量為每分鐘10ml左右; C. 把塑料袋內混合氣漸漸排于操作室內; D. 通過(guò)三次換氣后，操作室內氣體含氧量已處于極微量狀態(tài)。

8. 操作室第二次置換(氮氣置換)重復一次充氮過(guò)程，取樣室先抽真空，并注意隨時(shí)用腳踏開(kāi)關(guān)開(kāi)閉排氣。